纯化与定量
游离染料会抬高吸收读数和背景。先将其与产物分离,再测目标分子浓度和平均标记度(DOL);同时检查沉淀或聚集。计算使用对应染料的消光系数、吸收校正参数及目标分子的定量参数。
功能与保存
按相同目标浓度比较:抗体看特异结合与阴性背景,酶看活性,核酸看杂交或预期功能。保存前后用同一检测设置复测信号、聚集和功能。新制偶联物的保存条件按目标分子和配方确定。
固定比较条件
以目标分子浓度而非总蛋白浓度匹配样品;含 BSA 等添加物时,总蛋白量不能代表目标回收量。报告 DOL、目标回收率、阳性与阴性信号以及检测设置,便于决定是否需要调整投料或纯化。