目标带炔基
先确认目标上是末端炔还是 DBCO 等应变炔。末端炔与 Azide 染料反应需要 CuAAC 催化体系；DBCO 与 Azide 染料可进行无铜 SPAAC。普通伯胺或巯基不能直接用于这两种配对。
目标带叠氮
PEG4-DBCO 染料 与 PEG12-DBCO 染料 均用于叠氮目标。比较两者时按各自分子量换算等摩尔投料，再比较纯化后的标记度、背景和功能。反应前去除游离叠氮修饰试剂，并检查保存液中的叠氮化钠。
Azide 与 DBCO 点击反应配对
末端炔与 Azide 采用 CuAAC；DBCO 与叠氮采用无铜 SPAAC。
参考文献
用于生物偶联的铜催化叠氮–炔基点击反应
Presolski SI, Hong VP, Finn MG. · Current Protocols in Chemical Biology · 3(4):153–162 · 2011
以氮杂二苯并环辛炔进行无铜环加成与酶 PEG 化
Debets MF, van Berkel SS, Schoffelen S, et al. · Chemical Communications · 46(1):97–99 · 2010
DOI: 10.1039/b917797c
XanTec · DBCO 缓冲液兼容性
xantec.com