确认试剂与抗体信息
pH630 Deep Red anti-human 标记试剂（QH-17-1003）为 0.5 mg/mL、200 μL 液体制剂，缓冲液为 10 mM PBS、pH 7.4，含 50% 甘油。使用前轻柔混匀，无需复溶，禁止超声。抗体物种、亚型、完整抗体或片段形式及缓冲组分均应记录；“anti-human”名称本身不能证明所有人源抗体形式都适用。
按专用流程记录用量
按本品说明书混合待测抗体与标记试剂，再配制细胞检测工作液。比较多支抗体时，统一抗体终浓度、试剂配比和加样体积，并检查甘油及其他制剂组分在工作液中的最终含量。抗体与试剂的混合比例不是共价标记度，也不能套用 TFP 或 Maleimide 的摩尔投料和纯化规则。
将试剂背景与抗体背景分开
对照中保持培养基、加样体积和采集条件一致。需要确认靶标依赖时，还应加入合适的靶标阴性样品。
| 样品 | 检查内容 | 比较重点 |
|---|---|---|
| 细胞 + 培养基 | 细胞与培养基背景。 | 所有标记条件的基础读数。 |
| 细胞 + 标记试剂 | 无待测抗体时的试剂相关信号。 | 完整抗体—试剂混合物。 |
| 匹配同型抗体 + 标记试剂 | 非靶向及 Fc 相关背景。 | 相同浓度、配比的待测抗体。 |
| 未标记抗体的独立结合检测 | 标记过程是否改变抗体结合。 | 标记后的抗体结合表现。 |
将筛选结果接到后续验证
对候选抗体记录完整时间序列和细胞状态。若后续改用直接偶联的 TFP 或 Maleimide 染料，应重新比较结合活性与读数，不能把两种标记方式的原始荧光直接合并。对于 Fc 受体阳性的免疫细胞，目标结合与 Fc 相关摄取应分别评价。
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- pH630 Deep Red anti-human 标记试剂 · QH-17-1003 · 申请资料