区分表面与胞内信号
比较匹配时间点的图像，并分别观察细胞边缘和胞内区域。活细胞中出现胞内信号可能与内吞有关；单张终点图像不足以确定信号来源或运输路径。
检查定位证据
需要判断细胞器定位时，使用适用的独立标记，并通过单染对照排除串色。保持曝光和显示范围一致，避免将不同图像的自动对比度变化误认为信号转移。
安排表面与胞内信号比较
按细胞边缘与胞内区域分别定量，并记录染色、洗涤和采集的时间间隔。设置固定样品或低温处理等比较条件时，先确认其对细胞状态和糖链可接近性的影响；避免把处理带来的变化直接解释为内吞量。