纯化与标记度
先分离游离染料,再使用对应消光系数和吸收校正参数测 DOL,同时记录目标分子回收量。DOL 只能给出平均标记量;需要确认位点分布时,应另做适合该产物的分析。
使用环境中的稳定性
Maleimide–巯基加成物在含其他巯基的环境中可能发生交换。比较新鲜与保存后的偶联物,检查游离染料增加、聚集和功能下降,并记录缓冲液、温度和时间。保存期限需由该偶联物的结果确定。
去除游离染料后测标记度,再检查功能及保存后的信号变化。
仅示意连接关系,未展示完整化学结构。 AF 色点表示通用染料符号。
先分离游离染料,再使用对应消光系数和吸收校正参数测 DOL,同时记录目标分子回收量。DOL 只能给出平均标记量;需要确认位点分布时,应另做适合该产物的分析。
Maleimide–巯基加成物在含其他巯基的环境中可能发生交换。比较新鲜与保存后的偶联物,检查游离染料增加、聚集和功能下降,并记录缓冲液、温度和时间。保存期限需由该偶联物的结果确定。
Baldwin AD, Kiick KL. · Bioconjugate Chemistry · 22(10):1946–1953 · 2011
DOI: 10.1021/bc200148v
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