Maleimide 标记产物评价

去除游离染料后测标记度,再检查功能及保存后的信号变化。

Maleimide 与游离巯基原理示意
MALAF–Maleimide
R–SHR–SH
硫醚连接

仅示意连接关系,未展示完整化学结构。 AF 色点表示通用染料符号。

纯化与标记度

先分离游离染料,再使用对应消光系数和吸收校正参数测 DOL,同时记录目标分子回收量。DOL 只能给出平均标记量;需要确认位点分布时,应另做适合该产物的分析。

使用环境中的稳定性

Maleimide–巯基加成物在含其他巯基的环境中可能发生交换。比较新鲜与保存后的偶联物,检查游离染料增加、聚集和功能下降,并记录缓冲液、温度和时间。保存期限需由该偶联物的结果确定。

参考文献

还原环境中 Maleimide–巯基加成物的可调降解

Baldwin AD, Kiick KL. · Bioconjugate Chemistry · 22(10):1946–1953 · 2011

DOI: 10.1021/bc200148v

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