荧光淬灭剂
荧光淬灭剂可高效吸收邻近荧光基团的发射能量。启和生物提供全波长覆盖的淬灭剂产品,适用于 qPCR 探针、分子信标、FRET 分析等多种应用场景。
淬灭机理
FRET (荧光共振能量转移)
供体荧光基团通过长程偶极-偶极相互作用将能量转移至邻近淬灭剂。有效距离 10–100 Å,受光谱重叠程度和距离影响。
静态淬灭
荧光基团与淬灭剂形成非荧光基态复合物,直接抑制荧光发射,不依赖于分子扩散。
接触淬灭
荧光基团与淬灭剂在极近距离 (<10 Å) 通过电子转移或质子耦合实现淬灭,比 FRET 更高效。
淬灭剂类型
黑洞淬灭剂 (BHQ)
Black Hole Quencher,宽谱吸收无自身荧光,覆盖 480–730 nm,广泛用于 qPCR 探针。
无自身荧光宽吸收光谱与 FAM/TET/HEX/Cy5 配对极高淬灭效率
Dabcyl
经典偶氮类淬灭剂,吸收峰 ~453 nm,适用于蓝/绿色荧光基团 (EDANS/FAM)。
低成本经典方案吸收峰 453 nm匹配 EDANS、FAMFRET 基础研究
TAMRA
四甲基罗丹明淬灭剂,具自身荧光,吸收峰 ~565 nm,常用于分子信标。
具自身荧光信号吸收峰 565 nm分子信标经典配对FAM/TET 配对
QSY 系列
长波长深色淬灭剂,覆盖 500–750 nm,匹配 Cy3/Cy5/Alexa Fluor 系列。
长波长覆盖极低背景荧光Cy3/Cy5/AF 配对高淬灭效率
选择指南
| 淬灭剂 | 吸收范围 (nm) | 配对荧光基团 | 推荐应用 |
|---|---|---|---|
| BHQ-1 | 480–580 | FAM, TET, JOE | qPCR 探针 |
| BHQ-2 | 550–650 | HEX, TAMRA, ROX | 多重 qPCR |
| BHQ-3 | 620–730 | Cy5, Alexa 647 | 近红外探针 |
| Dabcyl | 400–500 | EDANS, FAM | FRET 底物 |
| TAMRA | 530–590 | FAM, TET | 分子信标 |
| QSY-7/QSY-9 | 500–600 | Cy3, Alexa 555 | 免疫荧光 |